400～1000升发酵罐使用说明:  

一、加水:到上试镜下方10厘米左右位置（★具体多少以煮完罐后水位到上试镜上方5厘米为宜）。

二:  通冷气（★目的是搅拌料，使料不容易沉淀，蒸汽遇冷水降低噪音），加料培养，盖好盖子。

三:   罐内培养料灭菌:先把蒸汽锅炉一端加热开关打开，排气阀微开，待有蒸汽产生时关闭排气阀，待压力达到4公斤压力时连接蒸汽管道，蒸汽管道确定连接安全后，打开蒸汽机出气阀门，确定蒸汽已经到达罐底部阀门时，再把罐体阀门打开，让蒸汽压入发酵罐内，罐体进蒸汽时，总阀门要慢慢打开，不要一下子开到底。这时开始煮罐，(★检查:罐顶端的排气阀门是打开的→进水阀门是打开的→温度显示器是打开的)

一直等温度升到90-95度左右时，随着罐内培养料温度升高，噪音将减小，培养料因水温高而翻滚，所以这时不需要冷空气搅拌了，关闭空气进入罐体中的所有阀门。

温度升到100度时，把罐体上面的排气阀门调节到微开的位置。温度升到125度～126度，压力达到0.14-0.15时，开始计时灭菌60～80分钟。(★在升温的过程中要保持温度和压力的平衡可以通过调节排气阀，或者调节下方进蒸汽总阀大小进行调节。

四、   罐体灭菌计时结束，(★关闭阀门顺序:关闭罐体下方进蒸汽总阀门→关闭蒸汽机排气阀→关闭蒸汽机电源)

五:   降温:在灭菌计时未结束前10分钟，把夹层进水阀门和出水阀门管道链接。等液体罐培养料灭菌计时结束，这时把冷水阀门一端的阀门打开，开始用冷水像罐体夹层加水降温。降温的同时，压力也会下降，(★夹层进水阀门接法:夹层下方阀门为进冷水阀门→夹层上方阀门为排水阀门→★夹层限制水压不得超过2.5公斤★)待用

六:   通冷空气搅拌降温:发酵罐通过冷水夹层降温，压力降到0.06--0.08时，给液体罐通冷气进行搅拌，夹层冷水循环，罐内空气搅拌，当发酵罐的温度降到所需温度时，把进水和出水阀门全部关闭，夹层保持满水状态培养(★夹层中有保温加热棒，缺水环境下回烧坏加热棒)待接种。

七: 、接种:接种前先把75度酒精喷壶、要接种的摇瓶、火焰圈、打火机、湿毛巾、开盖白钢杆准备好。用75度酒精把接种口周围灭菌，把摇瓶上面的锡纸或者牛皮纸打开，把火焰圈在95度酒精中浸泡后放到接种口周围，把墙壁上的气压调节阀，气压降低到排气阀可以完全卸掉罐压位置，点燃火焰圈，用白刚棍把接种口打开，拧到最后一圈，打开接种盖的同时，把排气阀关闭，把三角瓶摇瓶种拿过来，再把摇瓶口在火焰上高温灭菌处理，打开摇瓶上面的棉塞或硅胶塞，再次进行火焰高温灭菌处理，液体摇瓶种灭菌后倒入摇瓶液体菌，注意搅拌子不要倒入罐内，接种后迅速拿起接种盖在封口火焰上进行高温灭菌处理，迅速盖上，用白刚棍拧好，用湿毛巾把火扑灭，接种完成。再把通气量调到0.025～0.05左右培养。稳定压力30分钟不离开，直到压力稳定即可，(★接种时动作越轻，速度越快越好)

压力稳定后用记号笔或者标签在罐体上标好接种时间、日期和品种名称，直到培养结束，(★培养结束后放掉夹层冷水，清洗罐内待使用)